Preparation and immunogenicity evaluation of mRNA vaccine against porcine epidemic diarrhea / 生物工程学报

Porcine epidemic diarrhea (PED) is a highly contagious disease that causes high mortality in suckling piglets. Although several licensed inactivated and live attenuated vaccines were widely used, the infection rate remains high due to unsatisfactory protective efficacy. In this study, mRNA vaccine candidates against PED were prepared, and their immunogenicity was evaluated in mice and pregnant sows. The mRNA PED vaccine based on heterodimer of viral receptor binding region (RBD) showed good immunogenicity. It elicited robust humoral and cellular immune responses in mice, and the neutralizing antibody titer reached 1:300 after a single vaccination. Furthermore, it induced neutralizing antibody level similar to that of the inactivated vaccine in pregnant sows. This study developed a new design of PED vaccine based on the mRNA-RBD strategy and demonstrated the potential for clinical application.

Rice bran oil supplementation protects swine weanlings against diarrhea and lipopolysaccharide challenge / 浙江大学学报（英文版）（B辑：生物医学和生物技术）

Early weaned piglets suffer from oxidative stress and enteral infection, which usually results in gut microbial dysbiosis, serve diarrhea, and even death. Rice bran oil (RBO), a polyphenol-enriched by-product of rice processing, has been shown to have antioxidant and anti-inflammatory properties both in vivo and in vitro. Here, we ascertained the proper RBO supplementation level, and subsequently determined its effects on lipopolysaccharide (LPS)-induced intestinal dysfunction in weaned piglets. A total of 168 piglets were randomly allocated into four groups of seven replicates (42 piglets each group, (21±1) d of age, body weight (7.60±0.04) kg, and half males and half females) and were given basal diet (Ctrl) or basal diet supplemented with 0.01% (mass fraction) RBO (RBO1), 0.02% RBO (RBO2), or 0.03% RBO (RBO3) for 21 d. Then, seven piglets from the Ctrl and the RBO were treated with LPS (100 μg/kg body weight (BW)) as LPS group and RBO+LPS group, respectively. Meanwhile, seven piglets from the Ctrl were treated with the saline vehicle (Ctrl group). Four hours later, all treated piglets were sacrificed for taking samples of plasma, jejunum tissues, and feces. The results showed that 0.02% was the optimal dose of dietary RBO supplementation based on diarrhea, average daily gain, and average daily feed intake indices in early weaning piglets. Furthermore, RBO protected piglets against LPS-induced jejunal epithelium damage, which was indicated by the increases in villus height, villus height/crypt depth ratio, and Claudin-1 levels, as well as a decreased level of jejunal epithelium apoptosis. RBO also improved the antioxidant ability of LPS-challenged piglets, which was indicated by the elevated concentrations of catalase and superoxide dismutase, and increased total antioxidant capacity, as well as the decreased concentrations of diamine oxidase and malondialdehyde in plasma. Meanwhile, RBO improved the immune function of LPS-challenged weaned piglets, which was indicated by elevated immunoglobulin A (IgA), IgM, β‍‍-defensin-1, and lysozyme levels in the plasma. In addition, RBO supplementation improved the LPS challenge-induced dysbiosis of gut microbiota. Particularly, the indices of antioxidant capacity, intestinal damage, and immunity were significantly associated with the RBO-regulated gut microbiota. These findings suggested that 0.02% RBO is a suitable dose to protect against LPS-induced intestinal damage, oxidative stress, and jejunal microbiota dysbiosis in early weaned piglets.

Diarreia crônica associada a enteropatia arenosa em equinos / Chronic diarrhea associated with sand enteropathy in horses: report of three cases

A doença gastrintestinal relacionada à areia, também conhecida como enteropatia arenosa, é uma enfermidade gastrintestinal comum nos equinos mantidos a campo em regiões com solo arenoso frouxo resultando em sinais clínicos variáveis incluindo dor abdominal aguda, perda de peso, diarréia intermitente e baixa performance. Este artigo tem por objetivo relatar três casos de diarreia crônica em equinos associada à enteropatia arenosa. Três equinos da raça Quarto de Milha, dois garanhões e uma égua, com idades variando de 3 a oito anos, e peso médio de 433,33 + 41,66 kg foram examinados para diagnóstico de diarreia crônica. Nenhum dos animais apresentou sinais clínicos de dor abdominal aguda ou cólica recorrente que necessitasse de atendimento emergencial nesse período. Os animais foram manejados clinicamente por meio da utilização de Psyllium em pó na dose de 1g/kg de peso vivo por via oral a cada 24 horas durante 21 dias, além do fornecimento de 8 gramas de probiótico comercial. O tratamento foi eficaz na resolução do quadro clínico dos três animais.

Sand related gastrointestinal disease, also known as sandy enteropathy, is a common gastrointestinal disease in horses kept in regions with loose sandy soil resulting in variable clinical signs including acute abdominal pain, weight loss, intermittent diarrhea and poor performance. This article aims to report three cases of chronic diarrhea in horses associated with sandy enteropathy. Three Quarter Horses, two stallions and one mare, with ages ranging from 3 to eight years, and a mean weight of 433.33 ± 41.66 kg were examined for diagnosis of chronic diarrhea. None of the animals showed clinical signs of acute abdominal pain or recurrent colic that required emergency care during this period. The animals were clinically managed using Psyllium powder at a dose of 1g/kg bodyweight orally every 24 hours for 21 days, in addition to providing 8 grams of commercial probiotic. The treatment was effective in resolving the clinical status of the three animals.

Haptoglobin and its association with naturally occurring diseases in Holstein heifer calves / [Haptoglobina e sua associação com doenças ocorridas naturalmente em bezerras da raça Holandesa]

The present study evaluated the use of haptoglobin (Hp) as an indicator of health and performance in 166 Holstein heifer calves reared in an intensive production system. Calves were evaluated at D6-9; D10-13; D20-23; D35-38 and D65-68, corresponding to the days of life. The absence or presence of diseases was evaluated by physical examination and classification of scores. The performance parameters evaluated were body weight, height at withers and hind width. Hp was measured by spectrophotometric technique. The highest prevalence of diarrhea (59.4%; 98/165) was observed in D10-13, bovine respiratory disease (BRD) was on D35-38 (25.8%; 42/163), and umbilical inflammations in D6-D9 (7.8%; 13/166). Highest values of Hp were observed in animals with diarrhea (P=0.02), and umbilical inflammation (P=0.057), in comparison with the group of healthy calves. A significant negative correlation was observed between Hp and performance index. This protein presented an important relation with diarrhea and performance of the calves, opening perspectives on its utilization as a biomarker of diseases.(AU)

O presente estudo avaliou o uso da haptoglobina (Hp) como indicadora de sanidade e desempenho em 166 bezerras Holandesas criadas em um sistema de produção intensivo. As bezerras foram avaliadas nos momentos D6-9; D10-13; D20-23; D35-38 e D65-68, sendo estes correspondentes aos dias de vida. A ausência ou a presença de doenças foi avaliada por meio do exame físico e da classificação por escores. Os parâmetros de desempenho avaliados foram peso corporal, altura de cernelha e largura de garupa. A Hp foi mensurada por técnica espectrofotométrica. A maior prevalência de diarreia (59,4%; 98/165) foi observada em D10-13, doença respiratória bovina (DRB) ocorreu em D35-38 (25,8%; 42/163) e inflamações umbilicais em D6-D9 (7,8%; 13/166). O valor de Hp foi maior nos animais que apresentaram diarreia (P=0,02) e inflamações umbilicais (P=0,057), em comparação ao grupo de bezerras saudáveis. Houve correlação negativa significativa entre a Hp e os índices de desempenho. Essa proteína apresentou uma importante relação com a diarreia e com o desempenho das bezerras, abrindo perspectivas sobre a sua utilização como biomarcadora de doenças.(AU)

Occurrence of gastrointestinal parasites in dogs and cats domiciliated in Santos, SP, Brazil / Ocorrência de parasitos gastrintestinais em cães e gatos domiciliados em Santos, SP, Brasil

Abstract Helminths and protozoa are major causes of diseases in domestic animals, and many can also cause infections in humans. Knowledge of intestinal parasitoses affecting domestic animals is important for the implementation of appropriate preventive measures. The objective of this study was to evaluate the occurrence of gastrointestinal parasites in fecal samples of dogs and cats attended at the Veterinary Hospital of the Metropolitan University of Santos, SP, Brazil. We also attempted to determine whether such infection was associated with sex, age, or the presence of diarrhea. We analyzed 100 fecal samples: 85 from dogs and 15 from cats. Among the dogs, 31.8% of the samples were positive, and to 40.0% among the cats. Infection was not associated with sex or age. However, among the dogs, parasitism showed a significant association with the presence of diarrhea (P = 0.013). The helminths Ancylostoma spp. and the protozoa Giardia duodenalis were the most frequent parasites in this research. Although they present unknown species and assemblages, they are parasites with a zoonotic potential of great importance in public health. Therefore, it is essential that pets are properly diagnosed and treated against gastrointestinal parasitic infection to prevent the spread of diseases.

Resumo As enfermidades causadas por helmintos e protozoários representam uma das principais causas de doenças em animais domésticos, e muitos desses parasitos podem causar infecções em seres humanos. O conhecimento das enteroparasitoses que acometem os animais domésticos é de suma importância para que medidas preventivas adequadas sejam implementadas. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a frequência de ocorrência de parasitos gastrointestinais em amostras de fezes de cães e gatos atendidos no Hospital Veterinário da Universidade Metropolitana de Santos, bem como sua associação com o sexo, a idade e a presença de diarreia. Do total das amostras de cães analisadas, 31,8% estavam positivas, em relação aos gatos, e 40% apresentaram positividade. Não houve associação entre o sexo e a idade, porém, foi observada associação significativa entre a presença da parasitose e da diarreia (p=0,013) entre os cães. O helminto Ancylostoma spp. e o protozoário Giardia duodenalis foram os mais frequentes na pesquisa. Embora apresentem espécies e "assemblages" desconhecidas, são parasitos de potencial zoonóticos de grande importância em saúde pública. Assim, é essencial que os animais de companhia sejam corretamente diagnosticados e tratados contra infecções parasitárias gastrintestinais para evitar a propagação de doenças.

Diarreia em bezerros no sul do Rio Grande do Sul em um período de 34 anos / Diarrhea in calves in Southern Rio Grande do Sul in a period of 34 years

O objetivo deste trabalho foi descrever os dados de um estudo retrospectivo nos registros de 34 anos atividade de um laboratório de diagnóstico sobre as causas de diarreia em bezerros na região sul do Rio Grande do Sul. Foram revisados os protocolos de necropsia e materiais desta espécie encaminhados ao Laboratório Regional de Diagnóstico da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal de Pelotas. Foram diagnosticados 94 casos de bezerros com diarreia, destes, 44,7% foram de causas parasitárias e 34,0% de causas bacterianas. Diarreia de causa parasitária foi a mais importante na região sul do Rio Grande do Sul e afetou bezerros de três a 12 meses de idade. A ocorrência de diarreia em animais mesmo lactentes pode estar associada a fatores ambientais e a forma de manejo no qual esses animais são mantidos. As enfermidades bacterianas foram, também, importantes causas de diarreia em bezerros de até três meses de idade na região.

The objective of this work was to describe the data from a retrospective study in the records of 34 years of activity in a diagnostic laboratory on the diarrhea causes of in calves in the southern region of Rio Grande do Sul. All necropsy protocols and materials received in the Regional Diagnostic Laboratory of the Veterinary School of the Federal University of Pelotas were reviewed. Ninety-four cases of calves with diarrhea were diagnosed, of these, 44.7% were caused by parasitic infections and 34.0% by bacterial infections. Parasites as cause of diarrhea was the most important diagnostic in southern Rio Grande do Sul and affected calves from three to 12 months of age. The occurrence of diarrhea in animals even infants may be associated with environmental factors and the form of management that these animals are kept. Bacterial diseases are also important causes of diarrhea in calves up to three months of age in the region.

Diarreia em bezerros no sul do Rio Grande do Sul em um período de 34 anos / Diarrhea in calves in Southern Rio Grande do Sul in a period of 34 years

The objective of this work was to conduct a retrospective study of causes of diarrhea in calves in southern Rio Grande do Sul between 1980 and 2014. All necropsy protocols and materials received in the Regional Diagnostic Laboratory of the Veterinary School of the Federal University of Pelotas were reviewed. Ninety-four cases of calves with diarrhea were diagnosed, of these, 44.7% were caused by parasitic infections and 34.0% by bacterial infections. Parasites as cause of diarrhea was the most important diagnostic in southern Rio Grande do Sul and affected calves from three to 12 months of age. The occurrence of diarrhea in animals even infants may be associated with environmental factors and the form of management that these animals are kept. Bacterial diseases are also important causes of diarrhea in calves up to three months of age in the region.

O objetivo deste trabalho foi descrever os dados de um estudo retrospectivo nos registros de 34 anos atividade de um laboratório de diagnóstico sobre as causas de diarreia em bezerros na região sul do Rio Grande do Sul. Foram revisados os protocolos de necropsia e materiais desta espécie encaminhados ao Laboratório Regional de Diagnóstico da Faculdade de Veterinária da Universidade Federal de Pelotas. Foram diagnosticados 94 casos de bezerros com diarreia, destes, 44,7% foram de causas parasitárias e 34,0% de causas bacterianas. Diarreia de causa parasitária foi a mais importante na região sul do Rio Grande do Sul e afetou bezerros de três a 12 meses de idade. A ocorrência de diarreia em animais mesmo lactentes pode estar associada a fatores ambientais e a forma de manejo no qual esses animais são mantidos. As enfermidades bacterianas foram, também, importantes causas de diarreia em bezerros de até três meses de idade na região.

The occurrence of diseases and their relationship with passive immune transfer in Holstein dairy calves submitted to individual management in southern Brazil / Ocorrência de doenças e sua relação com a transferência de imunidade passiva em bezerras Holandês criadas em sistema individual no sul do Brasil

Calves are extremely dependent on colostrum intake for the acquisition of passive immunity. This study aimed to determine the occurrence of diarrhea and respiratory diseases and the impact of Failure of Passive Immune Transfer (FPIT) on the health and zootechnical performance of Holstein dairy calves in individual management. This study has been carried out in five commercial farms in Rio Grande do Sul State, Brazil, from March 2017 to January 2018. In this study, 131 calves were followed from birth to 60 days of age. Total Plasmatic Protein (TPP) has been performed to determine passive immune transfer quality in 53 calves (53/131). A daily clinical follow-up has been accomplished aiming at diagnosing diseases and their incidences, and zootechnical measures such as withers height, width of the croup and weight have been evaluated. FPIT rate was 32.07%, diarrhea occurrence and respiratory diseases were 77.9% and 49.6%, respectively. FPIT increased the chances of calves presenting diarrhea and developing respiratory diseases, but no differences on zootechnical performance were found. The frequency of FPIT is still high and is a factor that corroborated the increased risk for diarrhea and respiratory disease but did not influence the performance of calves in the preweaning phase.(AU)

Bezerras são extremamente dependentes da ingestão de colostro para adquirir imunidade passiva. Este estudo teve o objetivo de determinar os índices de ocorrência de diarreia e de doença respiratória, assim como o impacto da falha na transferência de imunidade passiva (FTIP) no desenvolvimento de doenças e no desempenho zootécnico de bezerras Holandês criadas em sistema individual. O estudo foi desenvolvido em cinco propriedades comerciais no Rio Grande do Sul, Brasil, entre março de 2017 e janeiro de 2018. Assim, 131 bezerras foram acompanhadas, do nascimento aos 60 dias de idade. Em 53 animais, foi realizada avaliação de proteínas plasmáticas totais para determinar a qualidade na transferência de imunidade passiva. Acompanhamento clínico diário foi realizado, a fim de diagnosticar doenças e suas incidências, assim como avaliações zootécnicas, como altura de cernelha, largura de garupa, perímetro torácico e peso. O percentual de FTIP foi 32,07%, a ocorrência de diarreias e de doenças respiratórias foi, respectivamente, 77,9% e 49,6%. A FTIP aumentou as chances de as bezerras apresentarem diarreia e doenças respiratórias, mas não alterou o desempenho zootécnico. Conclui-se que a frequência na FTIP ainda é elevada, fator que corroborou o aumento do risco para as diarreias e doença respiratória. Apesar disso, a FTIP não influenciou no desenvolvimento das bezerras na fase de aleitamento.(AU)

Antimicrobial resistance, diarrheagenic and avian pathogenic virulence genes in Escherichia coli from poultry feed and the ingredients / Resistência antimicrobiana, genes de virulência diarreiogênicos e patogênicos para aves em Escherichia coli isoladas de ingredientes e ração de frangos

Diarrheagenic (DEC) and avian pathogenic Escherichia coli (APEC) are associated with intestinal and extra-intestinal infections (ExPEC), respectively. We aimed to analyze the antimicrobial susceptibility, gene encoding virulence factors associated to DEC and APEC, and phylogenetic classification in E. coli isolated from 320 samples of feed and ingredients. Antimicrobial susceptibility was performed using the disk diffusion method and Multiple Antibiotic Resistance (MAR) Index and Multi-Drug Resistance (MDR) were calculated. Phylogenetic classification was performed on samples harboring DEC and/or APEC virulence-associated genes. A total of 110 E. coli strains were isolated in 15% (49/320) of the evaluated inputs (n=13 vegetable meal; n=33 animal meal, n=3 feed). In general, the isolates showed the highest rates of antimicrobial resistance to sulfonamide and cefazolin and 18% (20/110) were multi-drug resistant. MAR index of feed samples was the highest (0.467). Six and five strains had APEC and DEC virulence-associated genes, respectively, and belonging to phylogenetic groups A and B1. These findings point to the need for strict microbiological control during the production process of these foods.(AU)

Escherichia coli diarreiogênicas (DEC) e patogênicas para aves (APEC) são associadas a infecções intestinais e extraintestinais (ExPEC), respectivamente. O objetivo do presente trabalho foi avaliar a sensibilidade antimicrobiana, a presença de genes que codificam os fatores de virulência relacionados à DEC e APEC, e a classificação filogenética em E. coli isoladas de 320 amostras de ração para frangos e ingredientes. A sensibilidade antimicrobiana foi determinada pelo método disco-difusão e calculou-se o índice de resistência múltipla aos antimicrobianos (IRMA) e a resistência a múltiplas drogas (MDR). Nas amostras que possuíam genes de virulência relacionados à DEC e/ou APEC, foi realizada a classificação filogenética. Foram isoladas 110 amostras de E. coli em 15% (49/320) dos insumos avaliados (n=13 farelos vegetais; n=33 farinhas de origem animal; n=3 rações). De forma geral, os isolados apresentaram as maiores frequências de resistência antimicrobiana à sulfonamida e à cefazolina e 18% (20/110) foram resistentes a múltiplas drogas. O IRMA das rações foi o mais alto (0,467). Os genes que codificam fatores de virulência associados à APEC e DEC foram detectados em seis e cinco isolados, respectivamente, pertencentes aos grupos filogenéticos A e B1. Os resultados demonstram a necessidade de rigoroso controle microbiológico durante o processo de produção desses alimentos.(AU)

Detection of enteric agents into a cats' shelter with cases of chronic diarrhea in Southern Brazil / Detecção de agentes enteropatogênicos associados à diarreia crônica em um gatil no Sul do Brasil

This study carried out a survey about enteropathogenic agents in domestic cats' shelter as a stage of investigation for the intermittent chronic diarrhea. Individual fecal samples from 39 cats with free access to the external environment were submitted to parasitological examination, parvovirus, and coronavirus by PCR, and Cryptosporidium spp., Giardia spp. and Tritrichomonas foetus by real-time PCR. From the cats evaluated, 30 (76.9%) were positive for one or more enteric agents, and coinfections were observed in 11 cats samples (28.2%). Helminth eggs were observed in 48.7% of cats (19/30), 16 (41%) were positive for parvovirus or coronavirus and 25.6% (10/30) were infected by protozoa. From the positives for protozoa, five cats were positive to T. foetus (12.82%). The first finding of this protozoan through PCR was in the southern Brazil, and the second was in the whole country. Chronic diarrhea in cats may be multifactorial in shelter animals where the population density is high and the control of parasitic, and viral infections are deficient. Moreover, it is due to poor hygiene conditions in these shelters. The factors associated with the proliferation of infectious diseases in shelters are correlated with new pathogens infections such as T. foetus.(AU)

Uma pesquisa de agentes enteropatogênicos em gatos domésticos de um abrigo foi realizado como etapa da investigação das causas de diarreias crônicas intermitentes. Amostras fecais individuais de 39 gatos, com livre acesso ao ambiente externo, foram obtidas para pesquisa de helmintos através do exame parasitológico, investigação de parvovírus e coronavírus e de Cryptosporidium spp., Giardia spp. e Tritrichomonas foetus através de PCR em tempo real. Dos gatos avaliados, 30 (76,9%) foram positivos para algum ou mais de um destes agentes entéricos. Desses, 11 (28,2%) apresentaram co-infecções parasitárias. Ovos de helmintos foram observados em 48,7% dos gatos (19/30), 16 felinos (41%) foram positivos para parvovírus ou coronavírus e 25,6% (10/30) estavam infectados por protozoários. Dos positivos para protozoários, cinco apresentaram Tritrichomonas foetus (12,82%), um organismo pouco relatado no Brasil, sendo este o primeiro relato de detecção deste protozoário através de PCR em fezes de gatos no Sul do Brasil e o segundo no país. A diarreia crônica em gatos pode ser multifatorial em animais de abrigo onde a densidade populacional é elevada e os meios de controle parasitário e viral são deficitários, além das condições de higiene precárias. Os fatores associados à proliferação de doenças infecciosas em abrigos promovem o surgimento de infecções por novos patógenos como o Tritrichomonas foetus, até então pouco relatado no Brasil.(AU)

Investigation of Norovirus genogroups (GI, GII and GIV) in stool of pet dogs with diarrhea / Investigação de genogrupos de norovírus (GI, GII e GIV) nas fezes de cães de estimação com diarréia

In this study, we searched the existence of human norovirus (NoV) GI, GII and GIV in the stool of 128 pet dogs with diarrhea, of different sex, age and breed, in Burdur, Turkey, using Real-Time PCR method. Human NoV GII was found in only 5 of the 128 dog stool samples (3.91%). It was discovered that human NoV existed most in crossbreed, female and aged 24 months or over dogs. These dogs found with human NoV GII were either bought from pet shops, stray dogs or taken as puppy of another pet dog. The sheltering conditions of these dogs were moderate and they were fed with home food residue and dry food. It was also found that most of them were vaccinated and had certain walking sites. The owners of the animals detected with infection generally did not have the habit of washing their hands or changing their clothes before or after caring their pets. We strongly advice that dog owners' personal hygiene, the necessity of changing their clothes during their contact with animals, the environment provided for the dog, the sensitivity in caring, use of strong and effective disinfectant, keeping the dogs away from toilets and sewerage systems, as well as not feeding them with food residues are crucial issues in dogs' care. Owners of the dogs with NoV GII were middle aged or elderly people, male, and there were no children in their houses. As these dogs are treated like the owner's child, it is assumed that they could be transmitted with NoV GII as a result of close interaction with their owner.(AU)

Neste estudo pesquisamos a existência de norovírus humano (NoV) GI, GII e GIV nas fezes de 128 cães com diarréia, de diferentes sexos, idades e raças, em Burdur, Turquia, utilizando o método de PCR em tempo real. NoV GII humano foi encontrado em apenas 5 das 128 amostras de fezes de cães (3,91%). Foi descoberta NoV humana, principalmente em cruzamentos, fêmeas e cães com idade igual ou superior a 24 meses. Os cães encontrados com NoV GII humano foram comprados de lojas de animais, eram vira-latas ou foram tomados como filhotes de outro cão de estimação. As condições de abrigo desses cães eram moderadas. Os cães foram alimentados com restos de comida caseira e comida seca. Verificou-se também que a maioria dos animais foi vacinada e tinham locais adequados para caminhada. Os donos dos animais detectados com infecção geralmente não tinham o hábito de lavar as mãos ou trocar de roupa antes ou depois de cuidar de seus animais de estimação. Aconselhamos que a higiene pessoal dos donos, a necessidade de trocar de roupa durante o contato com animais, o ambiente fornecido para o cão, a sensibilidade no cuidado, o uso de desinfetantes eficazes, manter os cães longe de banheiros e esgotos, assim como evitar alimentá-los com resíduos alimentares, são questões cruciais no cuidado dos cães. Os proprietários dos cães com NoV GII são de meia-idade ou idosos, a maioria do sexo masculino, e não havia crianças em suas casas. Como esses cães são tratados como um filho, presume-se que eles foram infectados com o NoV GII como resultado de uma interação próxima com o proprietário.(AU)

What is known about Tritrichomonas foetus infection in cats? / O que sabemos sobre a infecção por Tritrichomonas foetus em gatos?

Abstract Tritrichomonas foetus is a parasite that has been definitively identified as an agent of trichomonosis, a disease characterized by chronic diarrhea. T. foetus colonizes portions of the feline large intestine, and manifests as chronic and recurrent diarrhea with mucus and fresh blood, which is often unresponsive to common drugs. Diagnosis of a trichomonad infection is made by either the demonstration of the trophozoite on a direct fecal smear, fecal culture and subsequent microscopic examination of the parasite, or extraction of DNA in feces and amplification by the use of molecular tools. T. foetus is commonly misidentified as other flagellate protozoa such as Giardia duodenalis and Pentatrichomonas hominis. Without proper treatment, the diarrhea may resolve spontaneously in months to years, but cats can remain carriers of the parasite. This paper intends to serve as a source of information for investigators and veterinarians, reviewing the most important aspects of feline trichomonosis, such as trichomonad history, biology, clinical manifestations, pathogenesis, world distribution, risk factors, diagnosis, and treatment.

Resumo Tritrichomonas foetus é um parasito que foi identificado definitivamente como agente de tricomoníase, caracterizada por diarreia crônica. T. foetus coloniza porções do intestino grosso dos felinos e se manifesta como uma diarreia crônica e recorrente, com muco e sangue, geralmente irresponsiva às drogas comumente usadas no tratamento. O diagnóstico da infecção por tricomonadídeos é feito pela demonstração de trofozoítos no exame direto de fezes frescas, cultura fecal e subsequente exame microscópico ou extração do DNA do parasito na amostra fecal e amplificação, utilizando-se técnicas moleculares. T. foetus é comumente confundido com outros protozoários flagelados, como Giardia duodenalis e Pentatrichomonas hominis. Sem tratamento adequado, a diarreia pode cessar espontaneamente em meses ou anos, porém os gatos podem permanecer portadores do parasito. Esse artigo pretende servir como fonte de informação para pesquisadores e veterinários, revisando os mais importantes aspectos da tricomoníase felina, como histórico, biologia, manifestações clínicas, patogênese, distribuição mundial, fatores de risco, diagnóstico e tratamento.

Outbreak of neonatal diarrhea caused by multiple genotypes of rotavirus A in a beef calves herd / Surto de diarreia neonatal por múltiplos genótipos de rotavírus A em um rebanho de bovinos de corte

Calf diarrhea causes substantial economic losses to beef cattle production worldwide. It is a complex multifactorial pathological condition influenced by infectious, nutritional and environmental factors. The present study focused on analyzing the pathological and molecular characterization of bovine rotavirus A (BoRVA) during a diarrhea outbreak in a beef cattle herd located in the state of Mato Grosso, central-western region, Brazil. The outbreak caused high morbidity (80%) and mortality (12%) among 1,100 calves up to 30 days of age. The BoRVA was identified in 53.3% (16/30) of the diarrheic fecal samples analyzed using the silver-stained polyacrylamide gel electrophoresis (ss-PAGE) technique. The nucleotide sequence analysis of VP7 (G genotype) and VP4 (P genotype) via RT-PCR from eight BoRVA-positive fecal samples showed the genotypes G6P[5] (n = 6), G6P[11] (n = 1) and G6P[X] (n = 1). Three calves were necropsied and the gross findings included edema and thickened, wrinkled bowel mucosa in the small intestine. Microscopic lesions were confined to the villi of the small intestine, characterized mainly by villus fusion and moderate multifocal lymphoplasmacytic enteritis. Immunohistochemical examination of three cases was positive for BoRVA. The 53.3% of the diarrheic fecal samples that were positive for BoRVA in this study suggested that RV was the etiological agent involved in this neonatal calf diarrhea outbreak.(AU)

A diarreia neonatal provoca perdas econômicas substanciais na produção de bovinos em todo o mundo. É uma condição patológica multifatorial complexa influenciada por fatores infecciosos, nutricionais e ambientais. O presente estudo teve por objetivo caracterizar o rotavírus tipo A (BoRVA) através da análise patológica e molecular durante um surto de diarreia em um rebanho bovino localizado no estado de Mato Grosso, região centro-oeste, no Brasil. O surto causou alta morbidade (80%) e letalidade (12%) em um rebanho composto 1.100 bezerros até 30 dias de idade. O BoRVA foi identificado em 53,3% (16/30) das amostras fecais diarreicas analisadas usando a técnica de eletroforese em gel de poliacrilamida corada com prata (ss-PAGE). A análise da sequência nucleotídica de VP7 (genótipo G) e VP4 (genótipo P) via RT-PCR a partir de oito amostras fecais BoRVA-positivas mostrou os genótipos G6P [5] (n = 6), G6P [11] (n = 1) e G6P [X] (n = 1). Três bezerros foram submetidos à necropsia e os achados macroscópicos incluíram edema e espessamento da mucosa do intestino delgado. As lesões microscópicas foram observadas nas vilosidades do intestino delgado, sendo caracterizadas principalmente por fusiosamento de vilosidades e enterite linfoplasmocitária multifocal moderada. O exame imunohistoquímico dos três casos foram positivos para o BoRVA. As 53,3% das amostras fecais diarreicas positivas para o BoRVA sugeriram que o rotavírus é o agente etiológico envolvido neste surto de diarreia neonatal em bezerros.(AU)

Sensitivity, specificity and comparison of three commercially available immunological tests in the diagnosis of Cryptosporidium species in animals

ABSTRACT The study was conducted to compare the specificity of immunological diagnostic methods used for the diagnosis of Cryptosporidium species capable of causing life-threatening infection in both immunosuppressed and immunocompetent patients. For the detection of Cryptosporidium species in 79 animals with diarrhoea, we used three Copro-antigen tests: RIDASCREEN® Cryptosporidium test, Cryptosporidium 2nd Generation (ELISA) and RIDA®QUICK Cryptosporidium. For immunoassays we used positive and negative samples detected by means of polymerase chain reaction and validated by sequencing and nested polymerase chain reaction to confirm the presence six different species of Cryptosporidium species. Prevalence of cryptosporidiosis in the entire group determined by enzyme immunoassay, enzyme linked immunosorbent assay, immuno-chromatographic test and polymerase chain reaction was 34.17%, 27.84%, 6.33% and 27.84%, respectively. Sensitivity of animal samples with enzyme immunoassay, enzyme linked immunosorbent assay, and immuno-chromatographic test was 63.6%, 40.9% and 22.7%, resp., when questionable samples were considered positive, whereas specificity of enzyme immunoassay, enzyme linked immunosorbent assay and immuno-chromatographic test was 75.9%, 78.9% and 100%, respectively. Positive predictive values and negative predictive values were different for all the tests. These differences results are controversial and therefore reliability and reproducibility of immunoassays as the only diagnostic method is questionable. The use of various Cryptosporidium species in diagnosis based on immunological testing and different results obtained by individual tests indicate potential differences in Copro-antigens produced by individual Cryptosporidium species.

Evaluation of growth performance and gastro-intestinal parameters on the response of weaned piglets to dietary organic acids

ABSTRACT Two experiments (E) were carried out to evaluate the effects of fumaric acid and an acidifier blend [composed by calcium formate, calcium lactate and medium-chain fatty acids (capric and caprylic)] in piglet diets containing colistin (40 ppm) or halquinol (120 ppm) on performance, diarrhea incidence (E1), organs relative weight, pH values, intestinal morphometry and microbiota (E2). In E1, 192 and E2, 24 piglets weaned at 21-day-old were randomly assigned to blocks with 2x2 factorial arrangement of treatments [absence or presence of fumaric acid x absence or presence of acidifier blend], six replicates of eight (E1) and one piglet per pen (E2). For E1, the treatments were control (CD): no acidifier product + 40 ppm of colistin, FA: fumaric acid in absence of acidifier blend, AB: acidifier blend in absence of fumaric acid and, AF+AB: presence of fumaric acid and acidifier blend. For E2, the pre-starter I diet were used and the same treatments as E1 evaluated. No treatment effects (P>0.05) were observed on performance, diarrhea incidence (E1), gut pH values and duodenum morphometry of piglets (E2). However, the addition of AB increased (P<0.05) large intestine relative weight and, FA addition decreased (P<0.05) pancreas relative weight, jejunum villi height and, total coliform and E. coli counts in cecum. The inclusion of FA and AB in diets containing colistin or halquinol did not improve performance, although FA exerted an inhibitory effect on cecum microbiota.

Isolation of Clostridium perfringens and C. difficile in crab-eating fox ( Cerdocyon thous - Linnaeus 1776) from Northeastern Brazil / Isolamento de Clostridium perfringens e C. difficile em cachorro-do-mato (Cerdocyon thous - Linnaeus 1776) da região Nordeste do Brasil

The aim of the present study was to isolate Clostridium perfringens and C. difficile in crab-eating fox (Cerdocyon thous) from Northeastern Brazil. Stool samples of 18 captive crab-eating foxes from four states of Northeastern Brazil (Alagoas, Bahia, Paraíba e Pernambuco) were collected and subjected to C. perfringens and C. difficile isolation. Suggestive colonies of C. perfringens were then analyzed for genes encoding the major C. perfringens toxins (alpha, beta, epsilon and iota), beta-2 toxin (cpb2), enterotoxin (cpe), and NetB- (netB) and NetF- (netF) encoding genes. C. difficile strains were analyzed by multiplex-PCR for a housekeeping gene (tpi), toxins A (tcdA) and B (tcdB) and a binary toxin gene (cdtB). Unthawed aliquots of stool samples positive for toxigenic C. difficile were subjected to a commercial ELISA to evaluate the presence of A/B toxins. Clostridium perfringens (type A) was isolated from five (27%) samples, and only one sample was positive for beta-2 enconding gene (cpb2). Two (11%) stool samples were positive for C. difficile, but negative for A/B toxins. These two wild canids were also positive for C. perfringens type A. This is the first report of C. difficile in crab-eating fox.(AU)

O objetivo deste estudo foi isolar Clostridium perfringens e C. difficile em cachorro-do-mato (Cerdocyon thous) da região Nordeste do Brasil. Amostras de fezes de 18 cachorros-do-mato mantidos em cativeiro e oriundos de quatro estados da região Nordeste do Brasil (Alagoas, Bahia, Paraíba e Pernambuco) foram coletadas e submetidas a isolamento de C. perfringens e C. difficile. As colônias sugestivas de C. perfringens foram analisadas para os genes que codificam as principais toxinas de C. perfringens (alfa, beta, épsilon e iota), toxina beta-2 (cpb2), enterotoxina (cpe) e NetB- (netB) e NetF- (netF). As cepas de C. difficile foram analisadas por PCR-multiplex para o gene tpi, toxinas A (tcdA) e B (tcdB) e um gene de toxina binária (cdtB). Alíquotas de amostras de fezes positivas para C. difficile toxigênico foram submetidas a um ELISA comercial para avaliar a presença de toxinas A/B. Clostridium perfringens (tipo A) foi isolado de cinco (27%) amostras, e apenas uma amostra foi positiva para o gene da toxina beta-2 (cpb2). Duas (11%) amostras de fezes foram positivas para C. difficile, mas negativas para toxinas A/B. Estes dois canídeos silvestres também foram positivos para C. perfringens tipo A. Este é o primeiro relato de C. difficile em cachorro-do-mato.(AU)

Detecção de coronavírus em amostras de fezes diarreicas de búfalos ( Bubalus bubalis ) criados no Estado de São Paulo / Detection of coronavirus in diarrhea samples from water buffaloes ( Bubalus bubalis ) raised in the State of São Paulo, Brazil

A diarreia neonatal pode ser consequência de infecções bacterianas, endoparasitarárias e virais. Enquanto esses agentes virais são extensamente estudados nos rebanhos bovinos, faltam informações sobre a importância destes para os rebanhos bubalinos brasileiros. O objetivo deste trabalho foi avaliar a presença de rotavírus e coronavírus em amostras de fezes diarreicas de búfalos (Bubalus buballis) criados em oito propriedades localizadas em Pariquera-açu, Registro, Pirassununga, Dourado, São João da Boa Vista e Congonhas, Estado de São Paulo. Foram coletadas 40 amostras de fezes diarreicas de bezerros búfalos (Bubalus bubalis). A detecção de coronavírus foi realizada pela nested-PCR, enquanto que a detecção de rotavírus foi realizada pela Eletroforese em Gel de Poliacrilamida (PAGE) com coloração com nitrato de prata. Enquanto rotavírus não foi identificado, duas amostras (2/40, 5,0%) foram positivas para coronavírus. Embora no presente trabalho tenha havido baixa detecção de coronavírus e a ausência de rotavírus nos rebanhos estudados, a possível interferência desses vírus no desenvolvimento dos quadros diarreicos não deve ser descartada. Considerando o escasso material encontrado na literatura a respeito da diarreia em bezerros búfalos, principalmente aquele relativo ao coronavírus, nossos resultados são um incentivo para que novos estudos sejam realizados para impulsionar o desenvolvimento da bubalinocultura em nosso país.(AU)

Neonatal diarrhea can be a consequence of bacterial, endoparasite and viral infections. Although virus involved in diarrhea is frequently studied in cattle herds, there is lack of studies in Brazilian buffalo herds. The aim of this study was evaluate the presence of rotavirus and coronavirus in diarrhea samples of buffaloes (Bubalus buballis) raised on eight farms in Pariquera-açu, Registro, Pirassununga, Dourado, São João da Boa Vista e Congonhas, State of São Paulo, Brazil. We collected 40 diarrhea samples from water buffalo calves. While coronavirus was detected using nested polymerase chain reaction, rotavirus was detected using Polyacrylamide Gel Electrophoresis (PAGE) with silver stain. Rotavirus was not detected, while two samples (2/40, 5.0%) were positive for coronavirus. Although we did not detect rotavirus, a low percentage of coronavirus was observed; possible interference of these viruses in the development of diarrhea should not be discarded. Considering the lack of literature about diarrhea in water buffalo calves, particularly the one related with coronavirus, our results encourage new studies to enhance buffalo health in our country.(AU)

Clinical, blood gas and biochemical profile of diarrheic dairy calves fed starter concentrate containing citrus pulp as a replacement for corn / Perfis clínico de gás sanguíneo e bioquímico de bezerros leiteiros diarreicos alimentados com concentrado inicial contendo polpa cítrica como substituto de milho

The objective of this study was to evaluate clinical signs, gas analysis, and metabolic effects of diarrhea in milk-fed calves consuming starter feed containing citrus pulp (CP) as a replacement for corn. Twenty-four newborn Holstein male calves were distributed into treatments according to starter composition: (1) 0% CP, (2) 32% CP, (3) 64% CP, on dry matter basis. The calves were housed in individual hutches, with free access to water and concentrate, and received 4 L/d of milk replacer. After diarrhea diagnosis, evaluations of fecal score, score of clinical signs and measurement of physiological parameters were performed three times a day during 3-d. Blood samples were collected for electrolytes, blood gases, and plasma biochemical analysis. Starter feed composition had no negative effect (P>0.05) on fecal score, characteristics of diarrheic stools and on the aggravation of diarrhea clinical signs. Biochemical, blood gases and electrolytes changes, as a function of starter composition, did not resulted (P>0.05) in dehydration, acidosis, or other metabolic disturbance animals. Total lactate and D-lactate plasma concentrations were higher for calves on control and 64% CP, and L-lactate was highest for the 64% CP; however, calves showed no signs of metabolic acidosis. Thermal comfort indexes influenced clinical and physiological parameters (P<0.05). Citrus pulp may replace corn in starter composition without prejudice to intestinal health or metabolism of young diarrheic calves.(AU)

O objetivo desse estudo foi o de avaliar os sinais clínicos, análise de gases e os efeitos metabólicos da diarreia em bezerros em aleitamento, consumindo concentrado inicial contendo polpa cítrica (PC) como substituto de milho. Vinte e quatro bezerros recém-nascidos da raça Holandesa foram distribuídos, de acordo com a composição do concentrado, nos seguintes tratamentos: (1) 0% PC, (2) 32% PC, (3) 64% PC, na matéria seca. Os bezerros foram alojados em abrigos individuais, com acesso livre a água e concentrado, e receberam 4L/d de sucedâneo lácteo. Após o diagnóstico de diarreia, avaliações de escore fecal, sinais clínicos e medidas de parâmetros fisiológicos foram realizadas três vezes ao dia durante 3-d. Amostras de sangue foram colhidas para análise de eletrólitos, hemogasometria e metabólitos plasmáticos. A composição do concentrado não afetou o escore fecal, as características das fezes diarreicas, ou o agravamento dos sinais clínicos da diarreia (P>0,05). Alterações nos parâmetros plasmáticos, de hemogasometria ou de eletrólitos, em função da composição do concentrado, não resultaram em desidratação, acidose ou outro distúrbio metabólico nos bezerros diarreicos (P>0,05). As concentrações de lactato total e D-lactato foram superiores para bezerros alimentados com concentrado sem inclusão de polpa ou com 64% de inclusão, enquanto a concentração de L-lactato foi superior somente para aqueles consumindo concentrado com 64% de PC. No entanto, os bezerros não apresentaram sinais de acidose metabólica. Os índices de conforto térmico influenciaram os parâmetros clínicos e fisiológicos (P<0,05). A polpa cítrica pode substituir o milho na composição de concentrados para bezerros sem prejudicar a saúde intestinal ou o metabolismo de bezerros jovens acometidos por diarreia.(AU)

Desempenho, frequência de diarreia, produção de fezes e custos de dietas com teores crescentes de farelo de abacaxi para leitões desmamados / Performance, diarrhea frequency, feces production and costs of diets with increasing levels of pineapple byproducts in weaned piglets

Esta pesquisa objetivou avaliar dietas com teores crescentes de farelo de abacaxi na alimentação de leitões desmamados. Foram utilizados 56 leitões, no intervalo de 21 a 63 dias de idade, que receberam dietas compostas principalmente por milho, farelo de soja e produtos lácteos, com adição de farelo de abacaxi em 0%, 3,4%, 6,8% e 10,2%. Foram avaliados o desempenho zootécnico; a incidência de diarreia; as excreções nas fezes, totais e por unidade de peso vivo ganho, de matérias seca (MS), mineral (MM) e orgânica (MO), nitrogênio (N) e fósforo (P); os custos relativos ao ganho de peso dos animais e os índices de eficiência econômica e de custo. As avaliações foram efetuadas dos 21 aos 35 dias; dos 21 aos 49 dias; e dos 21 aos 63 dias de idade dos leitões. Adotou-se delineamento em blocos ao acaso, de acordo com os pesos dos animais no início do experimento, com quatro tratamentos e sete repetições. Dos 21 aos 49 dias os animais submetidos às dietas com 3,4 e 6,8% de farelo de abacaxi consumiram mais ração (P<0.05) do que os alimentados com a dieta controle, e dos 21 aos 63 dias verificou-se maior ganho de peso (P<0.05) somente dos animais que receberam a dieta com 3,4% de farelo de abacaxi em relação aos leitões controle. Dos 21 aos 63 dias os animais que receberam as dietas com farelo de abacaxi apresentaram excreções de MS, MM, MO e N superiores (P<0.05) às dos animais controle. Contudo, ao se verificarem as excreções destes componentes nas fezes por unidade de peso vivo ganho neste mesmo período, foi constatado que não houve diferença (P>0.05) entre os leitões que receberam as dietas sem farelo de abacaxi e os que consumiram a dieta com 3,4% do produto. Portanto, a inclusão do farelo de abacaxi em dietas para leitões desmamados em 3,4% é viável, por não interferir negativamente nas excreções por unidade de peso vivo ganho e nos índices de custos das dietas e por proporcionar melhor ganho de peso aos leitões em relação àqueles que não consumiram farelo de abacaxi.(AU)

This research aimed to evaluate diets with growing levels of pineapple meal in weaned piglets feeding. Fifty-six piglets, from 21 to 63 days old, were fed diets composed mainly of corn, soybean meal, and dairy products, with the addition of pineapple byproduct in 0%, 3.4%, 6.8% and 10.2%. The parameters evaluated were: growth performance; diarrhea incidence; excretion in feces, total and per unit of weight gain, of dry (DM), mineral (MM) and organic (OM) matters, nitrogen (N) and phosphorous (P); diet costs related to weight gain, index of economic efficiency and of costs. The evaluations were performed from 21 to 35 days; from 21 to 49 days; and from 21 to 63 days of age. A complete randomized block design was adopted, according to the animal's weight in the beginning of the trial, with four treatments and seven repetitions. From day 21 to 49 the animals fed diets with 3.4 and 6.8% of pineapple meal consumed more feed (P<0.05) than those fed the control diet, and from day 21 to 63 only the animals that received the diet with 3.4% of pineapple presented a higher weight gain (P<0.05) than control piglets. From day 21 to 63 animals fed diets with pineapple meal presented higher (P<0.05) excretions of DM, MM, OM, and N than the control animals. However, checking the excretions of these components in the feces per unit of live weight gain in the same period, it was found that there was no difference (P>0.05) among the piglets fed diets without pineapple meal and those who consumed the diet with 3.4% of the product. Thus, the inclusion of pineapple meal in weaned piglet's diets at 3.4% is feasible, because it did not interfere negatively on excretions per unit of live weight gain and in diet cost indices, and provided better weight gain to the animals, as compared with pigs who did not consume pineapple meal.(AU)